Эксклюзивные материалы студентам Рефераты, курсовые, дипломные
Антигены, определяемые с помощью данного варианта ИФА, должны иметь несколько эпитопов, способных связывать антитела, или обладать повторяющимися, пространственно разделенными эпитопами одинаковой специфичности.
При проведении этого варианта ИФА высокоспецифичные поли- или моноклональные антитела, адсорбированные на твердой фазе, инкубируют с исследуемым образцом. После процедуры отмывания в лунки вносят меченные ферментом антитела (конъюгат) к тому же антигену и далее проводят все остальные этапы реакции. Эффективность образования специфического комплекса на каждой стадии анализа зависит от константы связывания реакции антиген-антитело.
Основные этапы анализа:
1. На твердой фазе иммобилизуют моноклональные антитела или аффинно-очищенные поликлональные антитела.
2. В лунки панелей вносят исследуемый образец, параллельно ставят положительный контрольный образец и отрицательный контрольный образец в различных разведениях. Инкубируют и отмывают.
3. В лунки вносят меченные ферментом моноклональные или поликлональные антитела – конъюгат. После инкубации проводят отмывку.
4. Вносят субстрат, инкубируют. Реакцию останавливают при достижении оптимального окрашивания в лунках с положительным контролем.
5. Учет результатов на ИФА-ридере.
Основным достоинством метода является высокая чувствительность, превосходящая возможности других схем ИФА (рис.4).
Рисунок 3. Непрямой ИФА для выявления антител.
Смотрите также
Диагностика начальных форм кариеса у детей
Профилактика стоматологических
заболеваний – вопрос, беспокоящий стоматологов нашей страны не первое
десятилетие. Реализовать массовую профилактику стоматологических заболеваний
пред ...
Липидный эпидермальный барьер
Кожа человека
выполняет множество жизненно важных функций. Занимая пограничное положение
между организмом и внешней средой, она защищает его от вредных внешних воздействий,
высыхания, прони ...
Инфекционные осложнения панкреонекроза и их микробиологическая характеристика.
...